久久久久99精品AV免费观看,国产精品96久久久久久AV不卡,亚洲国产一区二区三区在线观看,精品人妻无码AV一区二区

當(dāng)前位置:主頁(yè) > 技術(shù)文章 > 四種細(xì)胞破碎的方法

四種細(xì)胞破碎的方法

更新時(shí)間:2019-10-10 點(diǎn)擊次數(shù):16068

一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。


1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。


2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。


二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。


1.用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。


2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、*破碎細(xì)胞的較理想的方法。


3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。


三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。


有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。


四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。


綜合敘述:無(wú)論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。

掃一掃,加微信

版權(quán)所有 © 2025北京來亨科學(xué)儀器有限公司
備案號(hào):京ICP備2024080360號(hào)-1 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 sitemap.xml

国产精品国产亚洲精品看不卡| 人妻女友娇妻沉沦系列| caoporn免费视频在线| 久久久久精品无码专区| 免费观看视频app| 日本一本免费一区二区| 色欲精品国产一区二区三区av| 欧美高清性色生活片免费观看| 亚洲日韩精品无码一区二区三区| 中文无码人妻在线一区不卡| 亚洲av永久精品无码桃色| 无码人妻久久一区二区三区免费| 日韩欧美亚洲国产精品字幕久久久| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 中文字幕人妻无码乱精品偷偷| 久久久久久久久精品无码中文字幕| 亚洲精品无码一区二区| 乱码丰满人妻一二三区| 999久久久国产精品| 国产成人aaaaa级毛片| 欧美VPSWINDOWS| 女人国产香蕉久久精品| 国产CHINESE白嫩小受GV| 蜜桃麻豆WWW久久囤产精品| 亚洲精品日韩一区二区电影| 欧美成人精品一区二区免费| 麻豆高清免费国产一区| 大码HIPHOP欧美胖MM短袖| 色婷婷在线精品国自产拍| 咒术回战第二季免费观看| 久久午夜无码鲁丝片午夜精品| 无码熟妇人妻av在线影片软件| 间谍过家家第二季在线观看免费| 免费精品无码av片在线观看| 日本精品无码久久久久三级国产| 国产精品V欧美精品V日韩精品| 久久久久亚洲精品无码蜜桃| 国产福利视频| 久久最新地址获取| 免费国产黄网站在线观看可以下载| 成人禁片免费播放35分钟|