久久久久99精品AV免费观看,国产精品96久久久久久AV不卡,亚洲国产一区二区三区在线观看,精品人妻无码AV一区二区

當前位置:主頁 > 技術文章 > Folin-酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質含量

Folin-酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質含量

更新時間:2016-07-15 點擊次數:8501

Folin-酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質含量

 

一、實驗原理

  蛋白質含有兩個以上的肽鍵(—CO—NH),因此有雙縮脲反應,在堿性溶液中,能與CU2+  形成絡合物。Folin-酚試劑反應是在雙縮脲反應的基礎上,引進Folin試劑(磷鉬酸-鎢酸試劑),蛋白質-銅絡合物能還原磷鉬酸-磷鎢酸試劑,生成藍色物質。在一定條件下,藍色強度與蛋白質的量成正比例。

   本法的優(yōu)點是操作簡便、靈敏度高、較此外吸收法靈敏10~20倍,較雙縮脲法靈敏100倍,反應約在15min內有zui大顯色,并至少可穩(wěn)定幾小時。其不足之處是此反應受多種因素干擾。對雙縮脲反應發(fā)生干擾的基團,Tris.HCL緩沖劑以及蔗糖、硫酸銨、巰基化合物,酚類及檸檬酸,均對此反應有干擾作用。在測試時應排隊干擾因素或做空白實驗消除。含硫酸銨的溶液只需加濃Na2CO3-NaOH溶液即可顯色測定。若樣品酸度較高,顯色后色淺,則必須將Na2CO3-NaOH溶液的濃度提高1~2倍。

   本法可測定范圍是25~250µg蛋白質。          

二、實驗用品

(一)器材

 (1)722型分光光度計。

     (2)恒溫水浴鍋。

     (3)試管及試管架。

     (4)0.5ml,1ml及5ml移液管

  • 試劑

   (1)試劑甲。

   (A)4%Na2CO3溶液;

   (B)0.2mol/LNaOH溶液;

   (C)2%酒石酸鉀鈉溶液(或酒石酸鉀、酒石酸鈉);

   (D)1% CuSO4.5H2O溶液

     臨用前將(A):(B):(C):(D)=50:50:1:1(體積比)混合,此混合液即為試劑甲?;旌虾蟮娜芤?d內有效。

(2) Folin-酚試劑(試劑乙):在1.5L容積的磨口回流瓶中加入100g鎢酸鈉(Na2WO4.2H2O),25g鉬酸鈉((Na2MoO4.2H2O),及700ml蒸餾水,50ml 85%磷酸,100ml濃鹽酸充分混合,燒瓶內加小玻璃珠數顆,以防溶液溢出,接上回流冷凝管以文火回流10h?;亓鹘Y束后,加入150g硫酸鋰(LiSO4),50m重蒸水及數滴液溴,開口繼續(xù)沸騰15min,以除去多余的溴。冷卻后溶液呈金黃色(如果仍呈綠色,須再重復滴加溴水的步驟),定容至1L,過濾,濾液置棕色瓶中保存,可在冰箱長期保存。若此貯存液使用過久,顏色由黃變綠,可加幾滴液溴,煮沸數分鐘,恢復原色仍可繼續(xù)使用。使用時用標準NaOH滴定酸度,以酚酞為指示劑。該試劑的酸度應為2mol/L左右,將之稀釋至相當于1mol/L酸度使用,即為Folin-酚試劑。

(3)標準蛋白質溶液:可用結晶牛血清蛋白,預先經微量凱氏定氮法測定蛋白質含量,再根據其純度配制成500µg蛋白/ml溶液。

(三)材料

     血清使用前稀釋100倍或約含20~250µg蛋白/ml溶液。

 

三、實驗程序

    一、操作方法

 1.蛋白濃度標準曲線制作 

   取14支試管,分兩組按表9-1平行操作。

繪制標準曲線:以OD650值為縱坐標,標準蛋白量為橫坐標,在坐標紙上繪制標準曲線。

 

2.樣品溶液蛋白質濃度測定

  取6支試管,分兩組,按表9-2平行操作。

3、計算

掃一掃,加微信

版權所有 © 2025北京來亨科學儀器有限公司
備案號:京ICP備2024080360號-1 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

国产精品久久久久无码AV| 窝窝午夜精品一区二区| 无码视频一区二区三区| 嫩草院一区二区乱码| 欧美人c交zoozooxx| 午夜精品久久久久久久| 丰满欧美大爆乳性猛交| 东京热av人妻无码专区| 欧美VIVO2018| 国产成人一区二区三区影院动漫| 人妻无码熟妇乱又伦精品| 姐姐的朋友5免费观看| 国产va免费精品观看| 亚洲熟女少妇一区二区三区| 久久aⅤ无码av高潮av喷吹| 久久人做人爽一区二区三区| 色又黄又爽18禁免费网站现观看| 99国产精品成人av片免费看| 国产片+人+综合+亚洲区| 国产无套白浆一区二区| 欧美av| 无人在线观看高清完整免费 | 人妻无码视频一区二区三区| 麻豆免费视频网站入口在线观看 | 亚洲欧美婷婷五月色综合| 国产精品久久久久久一区二区三区| 国产又黄又爽又色视频免费软件| 速度与激情10免费版国语电影| 精品无码国产污污污免费网站2| 仙踪林果冻传媒一区二区| 国产激情久久久久影院| 国产AV午夜精品一区二区入口| 无码精品A∨在线观看无广告| 国产亚洲AV无码AV男人的天堂| 免费观看性生交大片| 东京热人妻系列无码专区| 国产精品毛片一区二区| 国产成人午夜精品一区二区三区| 欧美性生交xxxxx无码| 国产精品h片在线播放| 国产性生交XXXXX免费|